2.27　枸骨叶

Ⅰ药材简介

枸骨叶为多年冬青科植物枸骨Ilex cornuta Lindl.ex Paxt.的干燥叶^［1］。秋季采收，除去杂质，晒干。

三萜及其苷类是功劳叶的主要成分，此外还含有大量的黄酮类化合物，含咖啡碱等。三萜及其皂苷类主要有熊果酸、齐墩果酸、羽扇豆醇等。

【性味归经】味苦，性凉。归肝、肾经。

【功能主治】清热养阴，益肾，平肝。用于肺痨咯血，骨蒸潮热，头晕目眩。

【用法用量】内服：煎汤，9～15g。外用：适量，捣汁或熬膏涂敷。

【贮藏】置干燥处。

Ⅱ活性成分

熊果酸（ursolic acid）

别名：乌苏酸、乌索酸

【结构式】

【分子式与相对分子质量】

熊果酸 C₃₀H₄₈O₃　 456.68

【活性】

枸骨叶具有抗生育、扩张冠状动脉、抗菌作用，还具有抑制免疫细胞过度活化、增殖的作用^［2］。

【提取分离】

粉碎，加入85%乙醇溶液浸泡，然后加热回流，提取4h，重复2次。将提取液合并，减压浓缩至无醇味，加适量蒸馏水，用氯仿萃取3次，合并萃取液，并减压浓缩至浸膏状。

用粗硅胶（100～200目，1∶1）拌样，分别用石油醚、石油醚-乙酸乙酯［（20∶1），（10∶1），（5∶1）］梯度洗脱，浓缩各洗脱液得浸膏Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ。

对浸膏Ⅳ进行硅胶柱色谱分析，氯仿-甲醇（20∶1）洗脱，得到化合物熊果酸。

【熊果酸的测定】

取干燥枸骨叶粉0.5g，精密称重，置60mL索氏提取器中，用甲醇提取5h后，适当浓缩至小体积，将浓缩液转移至10mL量瓶中，并用甲醇洗涤提取烧瓶至完全，洗涤液合并于10mL量瓶中，用甲醇加至刻度，摇匀，为供试品溶液。在同一硅胶G薄层板上分别点供试品液2μL，熊果酸标准溶液0.5μL、1.0μL，依下述条件展开，显色，测定，计算结果。

测定条件：硅胶G预制板（10cm×10cm），展开剂为环己烷-氯仿-乙酸乙酯-甲醇（20∶5∶4∶1），展距8.5cm左右，展开，晾干后，自动喷雾器喷10%硫酸乙醇液，于110℃加热约5min显色，取出后立即用洁净玻璃覆盖薄层板，放置室温后测定。采用双波长反射法锯齿扫描，λ_S=520nm，λ_R=430nm，并加Ⅰ号滤光片。熊果酸标准品线性范围在0.50～1.98μg^［3］。

参考文献

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典：第一部［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：233.

［2］吴弢，程志红，刘和平等.中药枸骨叶脂溶性化学成分的研究［J］.中国药学杂志，2005，40（19）：1460-1462.

［3］常新全，丁丽霞.中药活性成分分析手册［M］.北京：学苑出版社，2002：354.