2.43　龙胆

Ⅰ药材简介

龙胆生药材为龙胆科多年生草本植物龙胆Gentiana scabra Bge.、叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、三花龙胆Gentiana triflora Pall.或滇龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根和根茎（前三种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”）。春、秋二季采挖，洗净，干燥^［1］。

龙胆中的化学成分主要为环烯醚萜苷类和生物碱类成分，龙胆苦苷为其中主要有效成分。因此龙胆苦苷即为龙胆的中药活性成分。

【性味归经】味苦，性寒。归肝、胆经。

【功效主治】清热燥湿，泻肝胆火。用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，湿疹瘙痒，肝火目赤，耳鸣耳聋，胁痛口苦，强中，惊风抽搐。

【用法用量】内服：煎汤，3～6g；或入丸、散。外用：适量，煎水洗；或研末调搽。

【贮藏】置干燥处。

Ⅱ活性成分

龙胆苦苷（gentiopicrin）

【结构式】

【分子式与相对分子质量】

C₁₆H₂₀O₉　 356.33

【活性】

（1）对消化道的影响：灌入犬胃瘘管中，能促进胃液分泌，且使游离酸增加；而舌下涂抹或静脉注射则无作用，故认为本品可直接促进胃液分泌和使游离酸增加。

（2）抗原虫：对疟原虫有较高的毒性，可用于疟疾发热及甲醛实验性关节肿等。

（3）抗炎：对角叉菜胶引起的大鼠足水肿有抑制作用。

【提取分离】

称取坚龙胆药材500g，用70%的乙醇溶液5L、4L依次回流提取，每次回流提取2h，滤过，合并滤液，减压浓缩至无醇味，冷冻干燥。将上述冻干的龙胆苦苷提取物通过AB-8大孔吸附树脂柱进行分离，称取适量龙胆苦苷提取物的冻干粉，用适量的蒸馏水溶解，离心，取上清液上样，依次用水、10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇进行梯度洗脱，每个梯度洗脱4个柱体积，分段收集，每250mL为1份。馏分收集完毕后，用95%乙醇洗脱2～3个柱体积，进而避免树脂中有物质残留。采用已经建立的HPLC分析方法测定各个洗脱梯度馏分中龙胆苦苷的含量。

在30%乙醇的馏分中检测出龙胆苦苷，且30%乙醇溶液可以把大量的龙胆苦苷洗脱下来，龙胆苦苷含量最高可达到68%，经检测40%乙醇馏分中龙胆苦苷含量极少。合并30%乙醇馏分中龙胆苦苷含量大于50%的部分，进行减压浓缩，冷冻干燥。取冷冻干燥后的龙胆苦苷粗品用MCI树脂柱进一步分离纯化。洗脱溶剂为乙醇–水，10%的乙醇溶解样品，离心，取上清液上样后先用10%的乙醇洗脱4个柱体积，然后用12%乙醇、15%乙醇、20%乙醇依次进行洗脱，每次洗脱4个柱体积。15%乙醇馏分中检测出龙胆苦苷，且龙胆苦苷的最高纯度可以达到98%，合并纯度大于97%的馏分减压浓缩，冷冻干燥，得龙胆苦苷^［2］。

【龙胆苦苷的测定】

高效液相色谱法：取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇10mL，放置12h，时时振摇，精密量取上清液2mL，置10mL量瓶中，精密加内标溶液2mL，加甲醇至刻度，即得。Kromasil C₁₈色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）。流动相：甲醇–水（25∶75）。流速：1mL/min。检测波长：270nm。柱温：30℃。进样量：10μL^［2］。

薄层扫描法：采用CS-9000双波长薄层色谱扫描仪，以氯仿-甲醇-水（10∶4∶1，下层）系统为展开剂，龙胆苦苷R_f值约为0.5，选择测定波长λ_S=285nm，参比波长λ_R=310nm，狭缝0.4nm×0.4nm，S_X=3^［3］。

高效毛细管电泳法：PA/CE5000型毛细管电泳仪，紫外检测器，System Gold软件，熔融石英毛细管柱（57cm×75μm，有效长度50cm）（Beckman美国）。以氯霉素为内标物，样品用甲醇超声处理。运行电解质为含10%甲醇的20mmol/L硼砂缓冲液（pH值10.6）；工作电压18 kV；毛细管恒温25℃；检测波长280nm^［4］。

参考文献

［1］ 国家药典编委会.中华人民共和国药典：第一部［S］.北京：中国医药科技出版社，2015：96.

［2］王琳琳，宋新波，李薇等.龙胆中龙胆苦苷的分离纯化［J］.现代中药研究与实践，2013，（5）：38-39.

［3］饶高雄，李倩然，高运玲等.薄层色谱扫描法测定龙胆和苦胆草片中龙胆苦苷的含量［J］.云南中医学院学报，2001，24（4）：1-3.

［4］曹雅男，孙岳，李璐等.高效毛细管电泳法检测生药龙胆中龙胆苦苷含量［J］.药物分析杂志，2005，（1）：81-83.